کیت سنجش NEFA ابزاری برای تعیین کمیت NEFA است

کیت سنجش NEFA ابزاری برای تعیین کمیت NEFA (نیتریک اکسید) است. برای تعیین غلظت NEFA در نمونه های خون یا بافت استفاده می شود. NEFA یک ماده مغذی حیاتی است که مسئول تنظیم متابولیسم انرژی، تحریک پذیری قلب، هدایت عصبی عضلانی، فشار خون و لخته شدن خون است. این عمدتا در استخوان، ماهیچه، بافت نرم و گلبول های قرمز خون یافت می شود.

آماده سازی

NEFA یک پروتئین کوچک 50.2 کیلو دالتون است که توانایی اتصال به DNA را دارد. این یک کمپلکس سیتوزولی نوع I اسید چرب سنتاز (FAS) است که اسید پالمیتیک غیر استری شده را تولید می کند. در حضور Acyl-CoA اکسیداز (ACS)، کمپلکس FAS 3-متیل-N-اتیل-N-(b-هیدروکسی اتیل)-آنیلین را به 4-آمینوآنتی پیرین اکسید می کند که پیش ساز مولکولی استیل-CoA است. این فرآیند یک فرآیند آنزیمی حیاتی برای همه موجودات یوکاریوتی است.

اگرچه NEFA ممکن است توده سنگین چربی را نداشته باشد، اما منبع سوخت مهمی برای بافت های محیطی است. توسط کبد متابولیزه می شود و به صورت کمپلکس با آلبومین به بافت های محیطی منتقل می شود. NEFA همچنین توسط یک دامنه تیو استراز (TE) از مجموعه FAS آزاد می شود.

پیپت کردن

کیت های ELISA برای تشخیص ترکیبات شیمیایی کوچک، پروتئین ها و پپتیدها استفاده می شود. این کیت ها بر اساس پروتئین های نوترکیب بیان شده در E.coli هستند. کیت ها حاوی آزید، تیمروسال و سایر منابع طبیعی نیستند.

در کیت، معرف هایی مانند BSA، بافر رقیق کننده بدون پیروژن و محلول شستشو وجود دارد. محلول شستشو به مدت دو هفته در دمای 8-2 درجه سانتیگراد پایدار است. بافر رقت حاوی 0.9٪ فیزیولوژیک سالین است.

این کیت دارای استاندارد داخلی NEFA است. این با NEFA در غلظتی که با غلظت مورد انتظار در نمونه مطابقت دارد، مشخص می شود. جذب رنگدانه آبی-بنفش در طول موج 546 نانومتر برای محاسبه غلظت NEFA در نمونه اندازه گیری می شود.

رنگ سنجی

استفاده از کیت WAKO NEFA نتایج مختلفی را به همراه داشته است، از جمله برخی از آنها بی معنی است. با این وجود، کیت NEFA در تعیین محتوای اسیدهای چرب نسبی نمونه‌های بافت حیوانی رقیب شایسته‌ای است. به این ترتیب، کیت NEFA یکی از محبوب‌ترین تست‌های آزمایشگاهی است. این کیت با دستورالعمل‌هایی برای آزمایش انواع مختلف نمونه‌ها از جمله خون، سرم، بزاق و انواع لیپیدها همراه است.

هیجان انگیزترین بخش کیت این است که می توان از آن برای اندازه گیری انواع اسیدهای چرب، از جمله آنهایی که معمولا در لیپیدها یافت می شوند، استفاده کرد. این کیت دارای طیف وسیعی از آنزیم‌های طراحی شده برای تشخیص انواع اسیدهای چرب، از جمله اسیدهای چرب C-8 و C-16 موجود در انسان و حیوانات است. با این وجود، کیت برای استفاده در غلظت های FFA با دقت بالا در محدوده وسیعی توصیه نمی شود.

الکتروشیمیایی

NEFAها اسیدهای چرب مهم در سلامت انسان هستند، اما به ندرت مورد ارزیابی قرار می گیرند. علاوه بر این، تشخیص آنها بسیار گران است. بنابراین، نظارت بر تغییرات غلظت آنها می تواند به پیشگیری و مدیریت دقیق تر بیماری کمک کند. در این مطالعه، یک کیت سنجش الکتروشیمیایی برای NEFA با استفاده از PDA-MWCNT به عنوان سطح سنسور توسعه یافت. این الکترود فعالیت الکتروکاتالیستی خوبی برای مراحل اکسیداسیون NEFA از خود نشان داد و می‌توان آن را در برنامه‌های کاربردی واقعی استفاده کرد.

الکترود آنزیمی شامل یک فیلم کامپوزیت چند لایه از PDA-MWCNT و ACOD، ACS و پلیمر بود. ترتیب لایه ها برای مطابقت با ترتیب واکنش آنزیمی انتخاب شد. مشخص شد که ACS و ACOD از نظر بیولوژیکی در فیلم فعال هستند.

غلظت NEFA در T2D

غلظت NEFA در خون در زمینه چاقی و فشار خون بالا مورد مطالعه قرار گرفته است. نشان داده شده است که این ترکیبات از طریق تحریک a1-آدرنرژیک باعث افزایش فشار خون می شوند و استرس اکسیدانی را افزایش می دهند. NEFA ها همچنین با سندرم متابولیک مرتبط هستند. این ترکیبات ممکن است در ایجاد فشار خون بالا مهم باشند.

چندین مدل برای توصیف پاسخ NEFA پلاسما به چالش گلوکز داخل وریدی پیشنهاد شده است. مدل بوستون به دقت مرحله چهارم افزایش غلظت NEFA را به تصویر کشید. با این حال، مدل فاز تاخیر اولیه را توصیف نکرد. مدل فابیان از یک شیب نمایی ساده برای توصیف این مرحله استفاده کرد. به طور مشابه، مدل توماس قادر به توصیف فاز برگشتی نبود.

سطوح NEFA در تری گلیسیرید

مطالعات متعددی اثرات جراحی چاقی را بر ترکیب NEFA پلاسما بررسی کرده اند. در یک متاآنالیز منتشر شده در سال 2016، سطح سرمی NEFA در 6 و 12 ماه پس از جراحی کاهش یافت. این ممکن است به دلیل کاهش سطح انسولین باشد. در مطالعه دیگری، NEFA های پلاسما در گروهی از بیماران چاق قبل و بعد از جراحی بای پس معده Roux-en-Y اندازه گیری شد.

غلظت هفت NEFA در 9 ماه پس از جراحی کاهش یافت. لینولئات (یک اسید چرب امگا 6) 18:2، استئارات 18:0 و اولئات 16:0 کاهش یافت. غلظت docosahexaenoate، با این حال، تحت تأثیر قرار نگرفت. NEFA ها به متیل استرهای اسید چرب (FAME) تبدیل شدند. سپس اینها توسط کروماتوگرافی گازی - طیف سنجی جرمی (GC-MS) آنالیز شدند.