بیایید با هم آینده ای فوق العاده بسازیم!
در زمینه تشخیص پزشکی مدرن، اندازه گیری شاخص های بیوشیمیایی نقش حیاتی در تشخیص، درمان و ارزیابی پیش آگهی بیماری ها دارد. در میان آنها، آدنوزین دآمیناز (ADA) به عنوان یک نشانگر آنزیمی مهم، نقش مهمی در تشخیص بیماری های مختلف ایفا می کند. ADA معمولاً با استفاده از یک کیت خاص اندازه گیری می شود. در اینجا به طور مفصل اصل کیت سنجش آدنوزین دآمیناز ADA بر اساس روش گلوتامات دهیدروژناز را معرفی می کنیم.
1. اهمیت فیزیولوژیکی ADA
ADA آنزیمی است که به طور گسترده در بافت های مختلف بدن انسان به ویژه در لنفوسیت ها وجود دارد. این ماده عمدتاً در فرآیند متابولیک آدنوزین نقش دارد و آدنوزین را به اینوزین و آمونیاک تبدیل می کند. تحت شرایط فیزیولوژیکی نرمال، فعالیت ADA در سطح نسبتاً پایداری باقی می ماند. با این حال، هنگامی که بیماری های خاصی در بدن انسان رخ می دهد، فعالیت ADA تغییر می کند. به عنوان مثال در بیماری هایی مانند پلورس سل، هپاتیت و سیروز، فعالیت ADA به میزان قابل توجهی افزایش می یابد.
2. اصل کیت تعیین ADA
اصل کیت سنجش ADA (روش اسید دهیدروژناز گلوتامیک) بر اساس ADA است که دآمیناسیون آدنوزین را برای تولید اینوزین و آمونیاک کاتالیز می کند و سپس از گلوتامات دهیدروژناز برای تبدیل آمونیاک به گلوتامات و تولید همزمان NADH استفاده می کند. NADH دارای جذب مشخصه در طول موج 340 نانومتر است. با اندازه گیری تغییر در جذب، می توان فعالیت ADA را به طور غیر مستقیم محاسبه کرد.
به طور خاص، کیت حاوی آدنوزین سوبسترای واکنش، کوآنزیم NADH، گلوتامات دهیدروژناز و دیگر معرفهای ضروری است. در طول واکنش، ADA دآمیناسیون آدنوزین را کاتالیز می کند تا آمونیاک تولید کند، که با α-کتوگلوتارات تحت اثر گلوتامات دهیدروژناز واکنش می دهد و گلوتامات تولید می کند، در حالی که NADH مصرف می کند. با اندازه گیری تغییر جذب NADH قبل و بعد از واکنش می توان فعالیت ADA را محاسبه کرد.
کیت تعیین ADA (روش گلوتامیک اسید دهیدروژناز) یک روش تعیین ADA حساس، دقیق و راحت است. این بر این اصل استوار است که ADA دآمیناسیون آدنوزین را برای تولید آمونیاک کاتالیز می کند و فعالیت ADA را با اندازه گیری تغییر جذب NADH محاسبه می کند. این کیت چشماندازهای کاربردی گستردهای در پزشکی بالینی دارد و برای بهبود دقت تشخیصی بیماریها، هدایت درمان و ارزیابی پیش آگهی اهمیت زیادی دارد.